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      大鼠膿毒癥模型

      更新時間:2025-04-09

      簡要描述:

      膿毒癥(Sepsis)是嚴重感染、嚴重創傷、燒傷、休克、后常見的并發癥,可導致膿毒性休克、多器官功能障礙綜合征(MODS)。已成為臨床危重病患者的重要死亡原因之一。全球每年膿毒癥患病人數超過1900萬,其中有600萬患者死亡,病死率超1/4,存活的患者中約300萬人存在認知功能障礙。

      大鼠膿毒癥模型是膿毒癥研究中的重要工具,借此模型的研究成果有望指導臨床,提高治療水平

      大鼠膿毒癥模型是膿毒癥研究中的重要工具,借此模型的研究成果有望指導臨床,提高治療水平。

      大鼠膿毒癥模型SOP

      背景:盲腸結扎穿孔模型(CLP)模型是接近于人類膿毒癥機制的模型,被稱為膿毒癥模型的“金標準"。CLP 技術在20世紀70年代被建立。CLP 模型非常適宜用于防治膿毒癥或膿毒性休克新藥的臨床前觀察

      實驗動物:

      品系:SD大鼠;性別:雄性;周齡:6-8周;體重:180-220g

      操作流程:

      1動物適應性飼養7天;

      2盲腸結扎穿刺(Cecal ligation and puncture, CLP)建立膿毒癥大鼠模型:麻醉 ,做腹部正中切口尋找盲腸,分離腸系膜后在盲腸中點結扎,后在結扎位置至盲腸遠端的中點用 20G針做貫通穿刺,擠出少許糞便置于盲腸表面,將盲腸回納腹腔并關腹。皮下注射鎮痛藥并放回籠中。

      模型嚴重程度

      盲腸結扎位置是CLP模型中死亡率和疾病嚴重程度的最主要決定因素。結論為:① 低位CLP或以下的死亡率幾乎為零,為輕度膿毒癥;② 中位CLP50%60%)的術后死亡率為30%,為中度膿毒癥;③ 高位CLP75%)的大鼠在術后7d內全部死亡,為重度膿毒癥。而在不同程度膿毒癥中,死亡主要集中在最初的48 h內。

      模型評估

      1. 觀察大鼠的行為和生理反應: 外觀自主意識 自主活動  外界刺激的反應 眼睛是否有分泌物 呼吸頻率和質量etc..

      2. 全血的菌落總數的單位CFU(Colony-Forming Units,菌落形成單位) 

      3. 血清指標 在手術后的0-72小時內,可以檢測血液相關反映炎癥水平和臟器損傷情況: 天冬氨酸轉移酶(AST) Bing氨酸轉移酶(ALT) 肌酸激酶(CK) 乳酸脫氫酶(LDH) 血肌酐(CR)、血尿素氮(BUN)  TNF-αIL-6etc.[1,2,3]

      4. 組織病理損傷檢測 通過肺、肝、腎組織石蠟切片進行糖原/HE.染色,可以觀察組織病理損傷的情況。例如,盲腸結扎穿刺法構建的膿毒血癥大鼠模型會發現腎小管上皮細胞膨脹、刷狀緣缺失、空泡變性、壞死、管型形成和細胞脫落等病理改變[1,2,3]

      多方面的指標檢測有助于評估膿毒癥大鼠的病理生理狀態嚴重程度和模型的有效性。

      1.Mitchell PS, Parkin RK, Kroh EM, Fritz BR, Wyman SK, Tewari M et al.Circulating microRNAs as stable blood-based markers for cancer detection. Proc Natl Acad Sci. 2008; 105: 10513-8.

      2. Xiao B, Wang Y, Li W, Baker M, Guo J, He YW. Plasma microRNA signature

      as a non-invasive biomarker for acute graft-versus-host disease. Blood. 2013;

      122: 3365.

      3. Yamaguchi T, Izumi Y, Nakamura Y, Yamazaki T, Shiota M, Iwao H. Repeated remote ischemic conditioning attenuates left ventricular remodeling via exosome-mediated intercellular communication on chronic heart failure after myocardial infarction. Int J Cardiol. 2015; 178: 239-46

       

       


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